罗伯塔佩斯： [00:00:00] 欢迎来到我们第三天的第一次谈话，我们将更多地了解疾病控制和预防中心的 AFM 生物储存库，然后是关于 AFM 研究的主持圆桌会议和问答环节。

[00:00:18] 加入我们的是 Eileen Yee，急性弛缓性脊髓炎医学流行病学家，CDC 国家免疫和呼吸系统疾病中心病毒疾病国内脊髓灰质炎小组分部，Amy Rosenfeld 博士，助理教授哥伦比亚大学微生物学和免疫学系、哥伦比亚大学感染与免疫中心助理教授 Nischay Mishra 博士和疾病预防控制中心 AFM 和国内脊髓灰质炎病毒小组负责人医学官 Janell Routh 博士。

[00:00:47] 该小组将由 Carlos Pardo 博士领导，Carlos Pardo 博士是巴尔的摩约翰霍普金斯大学医学院神经免疫学和病理学教授以及约翰霍普金斯脊髓炎和脊髓病中心主任，他将通过简要概述 AFM 研究并强调这些研究的重要性来开始对话。 帕多医生，您好。 交给你了。

Carlos Pardo 博士： [00:01:13] 非常感谢。 非常感谢你，罗伯塔。 很高兴今天早上来到这里。 感谢大家出席本次关于急性弛缓性脊髓炎的圆桌会议。 如您所知，自 2012 年以来，急性弛缓性脊髓炎一直是许多患者和家庭面临的重大挑战，但很可能在此之前对其他家庭也是一个挑战，因为急性弛缓性脊髓炎很可能是经常被忽视的疾病之一，在 2012 年之前被误诊或基本上没有得到很好的认识，当时急性弛缓性脊髓炎成为影响美国儿童的主要疾病。

[00:02:05] 急性弛缓性脊髓炎已在世界范围内被认为是一个主要影响儿童的问题，会导致相当多的神经功能障碍和非常大的压力，不仅对患者，而且对家庭. 急性弛缓性脊髓炎是一种非常棘手的疾病。 它似乎是一种传染性介导的疾病。 许多家庭成员都受到呼吸系统问题的影响，尽管许多家庭成员或家庭成员都受到呼吸系统问题的影响，但只有幼儿会受到急性弛缓性脊髓炎的影响。

[00:02:50] 甚至只有少数，家庭中只有一个孩子可能患上急性弛缓性脊髓炎。 下一个。 所以，我们对急性弛缓性脊髓炎的理解是，它是一个非常具有侵略性、非常严重的不断发展的问题。 你可以在这张幻灯片中看到，根据疾病预防控制中心在 2018 年爆发期间评估的患者人群中产生的特征，大多数患者，94% 的患者之前患有的疾病主要是发烧和呼吸道疾病。 但在几个小时内，最多 48 小时内，许多儿童实际上出现了非常严重的神经系统问题，特别是因为患者会瘫痪，而且其中许多患者，几乎 50%，实际上需要重症监护室管理，因为患者发展为呼吸衰竭。

[00:03:54] 不幸的是，大量受急性弛缓性脊髓炎影响的患者会留下严重的神经功能障碍。 实际上，其中将近三分之一，四分之一的人的上肢和下肢都瘫痪了。 几乎 40% 的患者在活动能力方面存在严重障碍，尤其是上肢。

[00:04:20] 所以，这是一个我们可能需要注意的非常重要的问题，因为它会导致大量的残疾和长期的神经系统问题。 如果我们看下一张幻灯片，我们就会明白，在我们面前，要理解和治疗急性弛缓性脊髓炎还有很长的路要走。

[00:04:47] 在全国各地，有不同的举措以改进诊断、改进监测为中心。 已经开展了一项非常重要的运动，旨在对临床儿科医生、神经科医生进行了解急性弛缓性脊髓炎的教育。 并且已经做出了非常重要的努力，集中在支持家庭方面的努力，因为这些患者的家人正在经历的长期问题，神经系统问题是压倒性的，显然家庭支持是至关重要的。

[00:05:25] 然而，研究是极其重要的一件事，那就是我们正在为了解急性弛缓性脊髓炎所做的工作。 在这里，我们需要概述该长列表中的不同项目，以了解急性弛缓性脊髓炎。 第一个可能是了解病毒性疾病和肠道病毒等特定病毒作为这种疾病的病原体的作用。 我们需要了解免疫系统。 我们需要了解免疫系统是如何作为身体中的防御机制参与的，或者甚至是激活可能产生一些伤害的机制。

[00:06:11] 我们需要改进诊断，我们需要更好地了解与预后和结果相关的不同因素。 而一个最重要的方面是改进诊断，改进治疗和预防以避免这些疑难病症。 下一个。 国家层面有不同的努力，所有的努力都与通过收集临床数据、收集生物样本和更好地了解疾病来了解疾病有关。

[00:06:44] 接下来，这些努力之一是由美国国立卫生研究院发起的一项研究，即急性弛缓性脊髓炎的自然历史研究，由伯明翰阿拉巴马大学的 David Kimberlin 博士协调。 美国国立卫生研究院主要资助这项前瞻性研究，以确定自然史、风险因素，并更好地了解疾病的致病机制。

[00:07:11] 下一个。 因此，当我们谈论这些研究时，我们谈论的是涉及全国很多人的研究。 而且，目前，全国有近 35 个中心参与了 NIH 自然历史研究。 它再次收集生物样本并以了解疾病为中心。 下一个。

[00:07:35] 我们正在做的一件事是病例对照研究。 病例对照研究是了解与疾病相关的风险因素的唯一途径。 通过这种方式，重点包括患有急性弛缓性脊髓炎的患者，这些患者已经发展为我们能够表征临床特征并且我们也能够获得生物样本的疾病。 下一个。

[00:08:02] 我们可能需要设立一个对照组，因为对照组将有助于理解，就好像我们在患者群体中看到的情况确实是一个因果关系，或者是不一定是因果关系。 我们基本上是让亲属或家庭居民和患有急性弛缓性脊髓炎的孩子作为组对照参与。 再次强调，获得这个对照组非常重要，因为这是获得生物样本的唯一途径，这些样本可用于促进更好地了解所有这些免疫学和病毒学因素。 下一个。

[00:08:52] 还有其他研究，例如由约翰霍普金斯大学公共卫生学院流行病学教授 Priya Duggal 博士领导的基因研究。 在过去的八年里，许多家庭都参与了这项研究，主要是为了了解是否存在影响急性弛缓性脊髓炎存在的遗传因素。 而此时此刻，已有超过150名患者和家属参加了这项研究。

[00:09:22] 但最重要的是，我们需要继续努力收集这些数据，以了解急性弛缓性脊髓炎。 CDC 的努力非常重要，是对 NIH 目前所做努力的补充。 因此，我将把我的麦克风传递给 CDC 的 Eileen Yee 博士，她将帮助我们了解 CDC 正在做什么来参与这些临床数据和生物样本的生物储存库收集。 艾琳，非常感谢你今天早上来到这里。

余爱玲医生： [00:10:03] 非常感谢 Pardo 博士的介绍。 现在，我想简单介绍一下 CDC AFM Biorepository。 再一次，我只想对 Rebecca、GG、Roberta 和 Pardo 博士以及 SRNA 邀请我参加今天的研究圆桌会议表示非常感谢。 并与您分享 CDC 如何参与这项研究计划。 下一张幻灯片。

[00:10:29] 正如 Pardo 博士所说，关于 AFM 有许多未解之谜。 其中一些也在 2020 年 XNUMX 月与国家过敏传染病研究所的研讨会上进行了讨论。

[00:10:41] Lerner 等人总结了一篇很棒的论文，其中列出了一些问题以及我们在 CDC 和研究界正在做的事情。 然而，正如 Pardo 博士所说，要回答其中一些问题，需要测试和分析 AFM 患者的临床标本。 因此，我们很快就认识到我们现在需要从 AFM 患者身上前瞻性地获取和收集这些生物样本。 所以，下一张幻灯片。

[00:11:15] 因此，一般来说，生物储存库是生物样本的集合，例如血液、粪便、脑脊液和其他临床标本，保存在能够保护、处理和储存生物材料的设施中以备将来使用。

[00:11:29] 下一张幻灯片。 2019 年底，CDC 与 General Dynamics Information Technology 和 McKing Consulting Corporation 签订了开发和维护 AFM Biorepository 的合同。 McKing 已经成功地为 CDC 设计并实施了另一个专注于 ALS 的生物样本库。 因此，他们是一位受欢迎的同事，可以协助 CDC 开展这项工作。

[00:11:56] AFM Biorepository……之前的幻灯片。 谢谢。 目标是建立一个与流行病学和临床数据相匹配的标本库，研究人员可以使用这些标本库来确定 AFM 的原因和风险因素，以及为受此病症影响的个人提供更好的治疗方案。

[00:12:16] 再次，正如 Pardo 博士所说，它旨在尽可能与 NIH 和 AFM 自然历史生物储存库保持一致，并且只是一个互补的研究项目。 你可以保留这张幻灯片。

[00:12:31] 这是纳入和排除标准。 纳入标准是任何年龄在三个月或以上的患者。 因此，我们确实包括了在过去 30 天内出现肢体无力并涉及一个或多个肢体提示 AFM 的成年人，并且医生向参与者和参与者的家庭成员提供了疑似 AFM 的诊断，并且他们同意使用他们的供将来使用的标本。 排除在外的显然是任何在 NIH 医院的人，或者患有 AFM 以外的已知疾病导致其肢体无力，或者如果他们是国家或囚犯的病房，或者他们拒绝同意参与。 下一张幻灯片。

[00:13:13] 可以通过三种机制确定符合条件的参与者。 当患者被识别并入院时，实际上可以通过其中一家合作医院的临床医生或现场协调员来识别他们。 其次，当向 CDC 报告疑似 AFM 病例时，可以通过州或地方卫生部门识别它们。 最后，患者及其家属可以直接进行自我识别并直接联系 AFM Biorepository 参与。 不过，在这些情况下，将要求参与者让他们的医生确认他们是 AFM 疑似病例。 下一张幻灯片。

[00:13:54] 总体而言，确定患者身份，然后共享信息材料。 然后医院或临床医生，甚至卫生部门，将直接联系 McKing，让他们了解潜在的参与者。 如果患者愿意参与，则知情同意书的登记将由 McKing 进行和协调。

[00:14:12] 如果还没有收集工具包，那么收集工具包将被运送到医院或患者家中（如果他们已经出院）。 急性或恢复期标本的收集将在一夜之间完成并运送到 Fisher BioServices，然后在那里进一步处理标本以进行长期储存。 下一张幻灯片。

[00:14:34] 在四肢无力发作后的 XNUMX 到 XNUMX 天内，在医院的任何地方收集急性标本。 这将包括血液样本、脑脊液、粪便或 NP/OP 拭子，四到八周后，将通过国家采血机构在患者家中或对他们更方便的地方收集恢复期标本。 他们只是在收集血液样本。 计划是将来自 NIH 和 CDC 生物样本库的所有这些标本合并到一个共同的生物样本库中。 下一张幻灯片。

[00:15:13] 目前，自 2020 年 2022 月以来，该研究全年都在积极招募参与者。他们将继续这样做，直到 XNUMX 年底。一些亮点，很快，就是与关键的积极参与与 McKing 合作的医院。 因此，这些医院已预先部署并准备好向 McKing 报告任何病例并收集标本。 因此，McKing 建立了一个医院网络，定期提醒他们 AFM Biorepository。

[00:15:41] 最后，通过许多不同的场所，如 CDC 和 SRNA 研究网站，可以轻松获取信息，并定期发送信息，开展了一场提高对该生物库认识的大型运动多个专业、医学和神经学协会的成员。 请放最后一张幻灯片。

[00:16:04] 如需更多信息，您可以访问 CDC AFM 网站，您可以找到描述 AFM Biorepository 和 NIH 自然历史研究的表格的链接。 您还可以通过他们的热线和电子邮件地址直接联系 McKing，提出任何问题或让他们知道任何疑似 AFM 的潜在参与者。

[00:16:24] 最后，我只想感谢 McKing 所做的工作，对于已经并将要为这些生物储存库做出贡献的患者，我们真的很感谢你们。 我们知道您现在参与研究可能不会直接受益，但我们知道 AFM 社区非常需要和感谢您的贡献。 因此，我们可以一起回答更多此类问题。 谢谢。 回到你身边，帕多博士。

Carlos Pardo 博士： [00:16:48] 非常感谢你，艾琳。 很高兴听到 CDC 的努力在很多方面与 NIH 和自然历史研究有很好的重叠。

[00:17:03] 因此，我们的听众和主持人中有两名研究界成员。 我想听听哥伦比亚大学的 Nischay Mishra 博士的意见。 他是一名研究员，也是一位非常敬业的科学家，致力于了解传染病的免疫学。 所以，Nischay，我们正在收集生物样本。 我们对诊断很感兴趣。 作为一名科学家，您介意简要介绍一下您在实验室中为理解原子力显微镜所做的工作吗？

Nischay Mishra 博士： [00:17:44] 首先感谢 Pardo 邀请我和 SRNA 发起如此好的倡议，感谢 Roberta 前几天带我完成了 Hopin 的整个过程。 因此，我准备了几张幻灯片，我将与大家分享，这样我们就可以讨论我一直在做的事情。 我在哥伦比亚大学感染与免疫中心工作，该中心被称为利普金实验室。

[00:18:07] 所以，基本上，我们使用分子、病毒学、血清学和免疫学板，如化验和知识来建立诊断和表征基因组化验。 不仅用于实验室诊断，我们还将其进一步用于审批流程，这对所有人都有用。

罗伯塔·佩斯：[00:18:30] Nischay，很快，我认为你的幻灯片目前没有被分享。

Nischay Mishra 博士： [00:18:34] 我现在正在分享。 是的。

罗伯塔佩斯： [00:18:36] 好的。 完美的。 谢谢。

Nischay Mishra 博士： [00:18:42]你们能看到我的屏幕吗？

罗伯塔佩斯： [00:18:47] 是的，我们可以。

[00:18:53] 是的，它看起来很完美。 谢谢。

Nischay Mishra 博士： [00:18:55] 是的。 因此，简要介绍一下我们一直在做的工作。 因此，在 2019 年，我们与 Oberste 博士的小组 CDC 呼吸道病毒小组合作，然后我们当时试图调查 EV-D68 直接或间接与急性弛缓性脊髓炎的关联。 因此，为此我建立了一个肽阵列阵列，涵盖所有肠道病毒的整个衣壳蛋白，以及当时怀疑的其他一些病原体——西尼罗河病毒、莱姆病等。 然后我们从 AFM 儿童身上采集了 CSF 样本，然后还从哥伦比亚大学和其他地方收集了来自其他疾病的对照。

[00:19:36] 那么，它是如何工作的呢？ 所以，这是一个载玻片。 这可以包含 180 到 200,000 个肽，肽被打印在玻璃阵列上。 我们使用含有一抗的样本。 所有的肽都覆盖了整个衣壳蛋白，具有 12 和 11 氨基酸重叠，因此我们没有任何伪影，或者我们没有遗漏任何表位结合位点。 而且它非常敏感。

[00:19:58] 所使用的样本量少于 3 微升。 因此，即使是可用的最小体积样本，我们也可以做到。 我们确实使用了 AFM 患者和对照的血清和 CSF 样本。 所以，基本上，我们在一夜之间加载样品，孵育可能含有表位结合位点的肽与样品中存在的抗体结合。 第二天早上，我们清洗它，然后使用可能具有不同标签的二抗。 可能是 Cy5、Alexa Fluor 和 CyXNUMX，我们可以一起检测至少两种抗体。

[00:20:30] 然后我们采用虚拟设计，这是打印在玻璃阵列上的所有 180,000 个共计 3 万个肽的坐标，我们重叠。 然后在出现任何信号后，我们更改任意单位，然后我们就可以知道该肽段是否为阳性。

[00:20:45] 之后，所有连续的肽，它们都没有打印在一起。 所以，为了避免任何一种神器，它们都是随机放置的。 然后我们使用一些建模工具进行回归分析和数据合并。 然后我们确定哪个是重叠的肽序列，哪个可能是与该样本反应的表位。

[00:21:04] 使用采样器方法，我们再次确定了共有肠道病毒基序，并且我们还确定了仅存在于 AFM 患者中的特定 EV-D68 肽。 你看到下面的面板。 这是我们在 2019 年与 CDC 的同事一起发表的。

[00:21:23] 这是，你可以看到 CSF 样本。 它们都是肠道病毒肽，这是保守的基序，因为它们是，它们有很多同源性。 我们总是预测其中一个区域，例如，肠道病毒血清诊断有多困难，因为它们密切相关，并且它们可以相互交叉反应，或者也可以增强彼此的抗体。 我们也根据 EV-D68 肽制作了肽 ELISA，然后我们也用 ELISA 测试了样品，我们发现与肽阵列数据有很好的相关性，这告诉我们这可以用于诊断，比如血清诊断，该肽对 AFM 患者的 EV-D68 检测敏感且特异。 基于这种意识形态，最近，比如去年或之前，我与 Amy Rosenfeld 合作。 她也在这个电话会议上，我们想扩展这个肽阵列。

[00:22:17] 所以，我通过技术改进扩大了肽阵列。 我现在可以在每个亚微阵列上打印 390,000 个肽，总共 6 万个肽。 我们从衣壳扩展到完整的多蛋白。 此外，我们添加了鼻病毒，因为它们与 EV-D68 密切相关。 我们还有一个随机的、用于背景收集的乱序肽。

[00:22:39] 所以，这个肽阵列正在使用中，我最近收到了一个样本，就像去年一样，来自德克萨斯州的凯文梅萨卡尔和本格林伯格。 去年我们使用了他们的几个实验。 对于 EV-D68 实验来说，它不是很有成效，因为它主要涉及 COVID 研究，但我们做了一些实验。

[00:22:57] 我们发现了一种额外的肽，我将对其进行更多分析，然后在不久的将来发布或与大家分享。 我会为此暂停一下，就像此刻，我们正在尝试做什么。 因此，由于我们已经确定了这些肽是 EV-D68，所以我与 Amy 合作，然后我们想了解这种肽的效用，以及我们如何使用这种肽进行快速诊断。

[00:23:27] 所以，我们，我们考虑过，因为有时患者和临床医生很难知道患者在呼吸急性期是否为 EV-D68 阳性。 所以，我们想做急性化验。 我们正在研究这一点，就像一种肽来提高抗体。

[00:23:45] 这些将专门用于肠道病毒 D68 检测。 我们用小鼠模型做了一些实验。 我们设计了一些肽，我们做了一些 ELISA，这些看起来很有希望。 因此，我们将继续推进我们正在研究的抗原捕获还原试验。 然后，我们还将寻找其他特定的肠道病毒肽。

[00:24:06] 我们正试图扩展这种基于抗原的检测或类似一些 Luminex 检测，我们可以快速检测，不仅检测，我们还可以在几个小时内区分它是哪种肠道病毒。 因此，如果患者在未来几周内出现任何类型的急性弛缓性脊髓炎症状，则可以在出现呼吸系统疾病时对检测到 EV-D68 的患者进行监测，临床医生和研究人员可以更具体地制定治疗方案以及诊断。 谢谢。

Carlos Pardo 博士： [00:24:38] 谢谢你，Nischay。 这非常有帮助。 而且，正如观众能够看到的那样，像 Nischay 这样的科学家在了解急性弛缓性脊髓炎的免疫学方面做出了非常重要的努力。 Nischay 提到了肠道病毒，但并不比 Amy Rosenfeld 博士更好地向我们解释为什么我们担心病毒，特别是肠道病毒作为与 AFM 相关的潜在因素，而且对于听众来说，有很多科学家——免疫学家、神经生理学家、但我知道，这里非常重要的科学家是病毒学，他们在理解传染病方面发挥着关键作用。

[00:25:25] 那么，艾米，你介意向我们解释一下为什么我们担心 AFM 中的肠道病毒吗？你为了解这种疾病所做的工作是什么？

艾米罗森菲尔德博士： [00:25:34] 谢谢 Carlos 和 SRNA 今天邀请我和你们谈话。 所以，我是一名基础科学家。 我是一名传统的基础病毒学家，我接任了我的职位，这是 Vincent Racaniello 和其他研究脊髓灰质炎的人所做工作的延伸。 脊髓灰质炎是我们与急性弛缓性脊髓炎或脊髓灰质炎相关的传统病原体。 实际上，急性弛缓性脊髓炎是一个用于实地观察儿童和调查因脊髓灰质炎病毒感染引起的瘫痪的术语。 现在我们认识到整个肠道病毒家族都可以导致 AFM 或急性弛缓性脊髓炎，它们是神经病原体。

[00:26:29] 所以我不仅对 EV-D68 感兴趣，它是当今 AFM 最臭名昭著的代理人。 但我对与 AFM 相关或感染与 AFM 相关的整个病毒家族感兴趣。 这些包括相关病毒，如柯萨奇 A16 和肠道病毒 71。我们对不同的病毒进行了完整的检测。

[00:26:57] 我们正在尝试制作动物模型，以了解原发性感染如何传播和进入中枢神经系统，并导致神经元死亡和免疫学，以及宿主免疫系统在发育过程中的作用过程。

[00:27:16] 此外，我们也有兴趣了解病毒是如何传播、脱落和理解的，并试图了解我们可以在哪些方面设计干预措施。 因为，一旦发现瘫痪，再设计干预措施就太晚了，必须早得多。

[00:27:40] 因此，当孩子出现呼吸道感染或其他症状时，不幸的是，这些症状中的许多通常与其他呼吸道病原体重叠。 因此，我们对与 Nischay 的合作很感兴趣，我们已经能够设计出一种能够区分和区分这些病原体的测试。

[00:28:04] 肠道病毒家族有很多保护措施。 我们传统上认为，如果你有针对病毒的抗体，我们就可以检测到它们，它被用作一种工具，可以记录一个人接触过哪些疾病或接触过哪些病毒。 今天我们知道这并不像我们想象的那么容易。 这些病毒之间有很多相似之处，因此，在病毒感染期间产生的许多抗体实际上可以识别整组病毒。

[00:28:39] 因此，我们正试图了解它是如何工作的，以及是否有关于你接触过的东西或抗体的缺乏导致你更容易受到这些二次破坏性后果的影响病毒感染。 我很乐意回答任何问题，并帮助您理解成为病毒学或一般意义上的基础科学家意味着什么。

Carlos Pardo 博士： [00:29:11] 谢谢你，艾米。 这很有帮助。 罗伯塔，如果我们能把整个小组召集到圆桌会议上，我想问问疾病预防控制中心的詹内尔·罗斯博士，他是急性弛缓性脊髓炎监测工作的负责人。 Janell，在当前 COVID-19 大流行的背景下，您介意向我们介绍一下过去几个月我们所看到的 AFM 和肠道病毒循环的最新情况吗？ 只需告诉我们，正在发生的事情以及我们对未来的期望。

Janell Routh 博士： [00:29:55] 卡洛斯，非常感谢。 再次，我要感谢 SRNA 和大家今天主持这个小组。 你知道，在过去的几年里，跟踪 AFM 的监视非常有趣。 我想大家都知道，我们上一次 AFM 案例的急剧增加发生在 2018 年。

[00:30:18] 我们知道，自 2014 年以来，我们看到病例有所增加，实际上是在 AFM 出现在全国舞台上的时候。 在 2014 年、2016 年和 2018 年，AFM 病例每隔一年就会增加一次。因此，我们非常期待 2020 年病例再次增加。然而，这与 COVID 大流行同时发生，有趣的是，我认为一些防止 COVID 传播的努力实际上阻止了其他呼吸道病毒的传播，包括肠道病毒 D68，正如 Amy 和 Nischay 提到的那样。

[00:31:01] 因此，我们在 2020 年没有看到 AFM 病例增加。所以，我认为我们都在想 2021 年会再次发生什么。但与 2020 年一样，我们没有看到急剧增加在原子力显微镜的情况下，幸运的是今年秋天。

[00:31:22] 我们知道，一般来说，AFM 往往出现在夏末、秋初的九月和十月。 但是，到目前为止，我们还没有追踪到今年案件的增加情况。 与此同时，我们也没有看到肠道病毒 D68 的传播增加。 同样，正如 Amy 提到的，我们认为这是 AFM 的主要原因，这些高峰年份是我们看到 AFM 增加的年份。

[00:31:53] 因此，至少今年到目前为止，AFM 和 EV-D68 流通量都没有增加。 将会发生什么还有待观察。 我知道我们看到肠道病毒和鼻病毒的整体传播有所增加。 但到目前为止，在这些高峰年份，我们倾向于将 AFM 与 AFM 相关联的特定病毒还没有。

[00:32:17] 我们继续保持警惕。 我们在全国每个州都有一个疫苗可预防疾病协调员网络，临床医生会报告 AFM 疑似病例。 我们不断与他们保持联系并监控情况。 所以，祈祷我们现在进入深秋时不会看到增长。

[00:32:41] 然后所有的目光都将集中在 2022 年。同样，很难预测我们在 2022 年会看到什么，但是，你知道，我们在 CDC 的 AFM 团队的主要目标之一是提高意识并促进教育，以便全国的医生了解 AFM 是什么，并对症状保持警惕。 因此，我们将在 2022 年继续这样做，以确保我们能够发现任何疑似病例或增加病例。 交给你了。

Carlos Pardo 博士： [00:33:16] 谢谢你，贾内尔。 这很有帮助。 所以，我首先要问 Amy，然后再问 Nischay。 所以，艾米，在临床环境中，我们收集鼻拭子，只是为了证明有病毒或没有病毒。 在临床环境中，我们收集血液样本以查看是否有任何标记可以帮助我们识别 AFM。 作为一名研究人员，您是否介意向听众解释一下，您如何使用这些样本来尝试识别病毒以及这些样本有多大帮助，并且，特别是要强调为什么这些样本基本上对了解原子力显微镜的未来？

艾米罗森菲尔德博士： [00:34:06] 因此，我们首先使用这些样本来增强我们的建模。 所以，一般来说，这些样本非常非常难从中培养传染性病毒。 但我们使用它们来确定、识别存在于那里的基因组或 RNA。 这给了我们一些关于存在什么病原体的迹象。

[00:34:35] 然后我们尝试使用实验室中的动物来模拟人类疾病。 我们使用这些样本进行追踪，以确保我们的模型符合我们认为的疾病实际情况。 然后了解机制，进行机制研究以了解是什么导致 AFM 或什么导致病毒从呼吸道传播到 CNS。

[00:35:01] 我们真的很喜欢样本来了解病毒的进化，所以病毒是否随着时间发生了变化，以及这些变化是否与或多或少的严重疾病有关。 因此，这在某种程度上在公众对 SARS-CoV-2 感染、疫苗耐药性或增强、或逃逸以及我们所看到的变异的讨论中确实发挥了很好的作用。

[00:35:31] 所以，不管你与否，我们都同意对数据的解释，我们可以看到病毒从最初分离到今天已经发生了变化，这些变化是否会导致任何表型变化。 这几乎就是我们使用这些来自任何病毒的样本的目的。 因此，EV-D68、entero 71、coxsackie A16，以及任何我们想要追踪的变化是否真的有助于了解病症是否也在发生变化。

卡洛斯帕多博士：[00:36:08] 谢谢你，艾米。 所以，Nischay，你在你的实验中谈到了用于检测肠道病毒的免疫学。 你在谈论肽和你的免疫学研究的所有这些方面。 但是您能否向我们解释一下敏锐地了解免疫系统的价值以及您或艾琳在她的演讲中提到的恢复期血清？ 那么，当我们要求家人获得、允许我们在几周后甚至几个月后迅速获得生物样本时，有什么价值呢？ 你介意简单解释一下吗？

Nischay Mishra 博士： [00:36:53] 当然，Pardo 博士，所以有几件事。 就像，这些孩子大多处于生命周期的早期阶段，了解他们是否接触过这种病毒或任何这些病毒​​，EV-D68 或任何肠道病毒，这是否是他们一生中的第一次感染仍然很重要？ 此外，了解这一点很重要，因为我们已经多次讨论过 ADE、抗体依赖性增强等。

[00:37:20] 所以我们需要知道是哪种病毒，比如肠道病毒 D68，这是第一个接触到导致 AFM 的儿童的肠道病毒，或者之前发生过肠道病毒感染，并且以相反的顺序可能导致。 所以，到目前为止，我们知道与 AFM 病例相比，有成百上千或更多的肠道病毒感染。 但是知道这一点对于了解案例和控制非常重要。

[00:37:43] 因此，我们采取不偏不倚的做法。 我们将病毒蛋白分成非常非常小的一部分。 那是12个氨基酸。 因此，减少交叉反应和抗体检测。 如果我们在 AFM 病例中检测到某些东西或未检测到对照病例，反之亦然，我们希望在一两个月后查看这些抗体是否仍残留在患者体内，或者它们在该患者体内正在耗尽，还是在增加在患者中，它们的作用是什么——增加、减少或消失患者的结果。 因此，如果我们进行此类加减研究，我们将需要确定答案，然后我们才能带头继续进行治疗和早期诊断。

Carlos Pardo 博士： [00:38:32] 谢谢你，Nischay。 Eileen，我们在临床环境中经常遇到的问题之一是，许多患者在到达三级医院、大学医院时，已经接受了类固醇治疗，甚至接受了静脉注射免疫球蛋白、IV 或 IVIG，甚至血浆置换治疗. 临床医生应该如何处理这些样本？ 他们能否与 CDC 存储库共享这些样本？

余爱玲医生： [00:39:03] 是的，他们是。 特别是当一些儿童在门诊接受抗生素或类固醇治疗时。 我们仍然希望他们提交样品。 就成功找到病原体而言，样本的及时性也非常重要。 因此，我们仍然希望收集这些信息，并且在某个时候能够收集到更多关于它们的信息。

Carlos Pardo 博士：[00:39:30] 谢谢你，艾琳。 艾米，家属在临床环境中经常问我们的问题之一，这是一种新病毒还是因为病毒已经传播了几个世纪而发生变异的病毒？ 那么，这是一种新病毒还是自 2012 年以来发生变异的病毒？

艾米罗森菲尔德博士： [00:39:51] 所以，它不是一种新病毒。 它没有发生变异。 它是一种最初于 1962 年分离出来的病毒，但这并不意味着它之前不存在。 那是刚刚被隔离的时候。 而且，我们已经证明，我的工作已经证明病毒总是能够在神经系统的细胞内引起或复制。

[00:40:17] 所以，这不是病毒的新特性。 我们假设的实际上是 AFM 存在基线这一事实。 大多数儿童，大多数 AFM 病例，在接种脊髓灰质炎疫苗之前，都与脊髓灰质炎病毒感染有关，因为这是一种更普遍的感染。 因此，有更多的小儿麻痹症病例。 它显然是一种比 EV-D68 更强大的病毒，并且可能更容易传播，因为它是通过口腔粪便等途径传播的。 但是随着脊髓灰质炎传播的减少，以及两种非常有效的疫苗，口服脊髓灰质炎疫苗和 IPV，它让我们看到导致 AFM 的频率降低了。

[00:41:20] 这就是我们的假设。 实际上，可能使用不同形式的脊髓灰质炎疫苗对儿童进行管理或免疫接种也可能会削弱我们检测 EV-D68 的能力，因为我们相信我们拥有能够由脊髓灰质炎疫苗与 EV-D68 结合并阻止 EV-D68 传播到次级器官部位，这就是中枢神经系统。

[00:41:53] 随着 OPV 变为 IPV，该过程可能已经中断。 因此，它不是一种新病毒。 它没有改变。 由于 EV-D68 感染而患上 AFM 的患者中，这一比例要低得多，与脊髓灰质炎相比，每千名感染者中就有一人。

[00:42:19] 所以，你可以看到当你十倍、一百个日志、两个日志关闭时，为什么当你采用大量人口时，你可能无法检测到 EV-D68 或自动将 EV-D68 感染与瘫痪的发展。

Carlos Pardo 博士： [00:42:36] 谢谢你，艾米。 这是 Janell 的问题。 Janell，过去，我需要承认，我有时害怕将样本送到 CDC 进行诊断，但我在过去几年中了解到，CDC 作为机构的合作和共享样本的精神正在开始发展与研究人员。 我们发送给 CDC 的那些样本将如何与 Nischay、Amy 或其他实验室共享？ 您介意对此进行扩展吗？

Janell Routh 博士： [00:43:11] 当然，卡洛斯。 是的。 因此，临床医生通过国家卫生部发送给 CDC 的所有标本都到达了我们的实验室。 卡洛斯，正如你提到的，我们确实对肠道、鼻病毒进行诊断研究，然后，如果这些研究呈阳性，我们将继续对这些肠道病毒进行分型，以确定我们患有 AFM 或疑似 AFM 的患者的标本中存在哪些类型。

[00:43:41] 然后，标本被储存在我们的实验室，可供使用。 我们有两个很好的合作，一个是与 Nischay 的实验室，另一个是在旧金山的加利福尼亚大学提供标本，包括脑脊液标本，这些标本是我们在他们的研究中使用的更有价值的标本。化验。 并且很高兴讨论与这些标本向前发展的其他合作。

[00:44:16] 所以，这是在 CDC 与我们取得联系并讨论合作的问题。 正如 Yee 博士所提到的，我们正在推进 AFM Biorepository，它将收集更多的样本进行储存。 然后这些标本将与 NIH Biorepository 合并成一个共同的生物储存库，供研究人员继续使用。

Carlos Pardo 博士： [00:44:47] 谢谢你，贾内尔。 听众提出一个问题，即我们正在了解被诊断患有 AFM 的儿童的预后，以及在诊断后 2 年、5 年、10 年是否有改善的希望？ 实际上，我会带头回答这个问题。 我们的经验是，有很好的证据表明，与成人相比，患有脊髓炎的儿童的康复速度要好得多。

[00:45:22] 儿童身上有一种叫做突触可塑性和神经可塑性的东西，可以让儿童在中枢神经系统受伤后更好地恢复，无论是大脑还是脊髓。 AFM 是另一个例子。 在过去的几年里，我们在我们的康复中心观察到，许多受 AFM 影响的孩子都留下了严重的残疾。

[00:45:50] 但这并不意味着没有恢复的希望。 例如，我们最近从一位依赖呼吸机的患者那里了解到，在将近两年后，通过干预、康复和努力变得依赖呼吸机，实际上这位患者拥有更好的呼吸能力。

[00:46:12] 因此，了解康复过程不仅是医疗干预，而且是康复团队和物理治疗师、职业治疗师以及参与的整个团队的干预是极其重要的这些患者的康复。 所以，这是一个非常重要的问题，因为如果有弹性并且努力改善我们所有的 AFM 患者，我们总会有希望，我们在未来会有更好的结果。

[00:46:43] 我想简单地问一下我们的四位参与者，关于原子力显微镜的研究，您对我们的听众，尤其是家长，尤其是家庭成员的愿望和主要信息是什么？ 艾米，让我从你开始。 你的主要信息是什么？

艾米罗森菲尔德博士： [00:47:06] 我的主要信息是基础科学将带领我们摆脱困境。 这是关于了解身体如何运作，病毒如何与身体相互作用，并且永远不要低估基础科学，因为这将告诉我们需要做什么。

[00:47:28] 它将揭示我们不知道或未被充分认识的相互作用。 因此，呼吸系统是如何受到支配的，以及它如何导致运动神经元疾病（上肢受损），以及免​​疫系统如何对此做出反应并与病毒的传播或干预相互作用。

[00:47:53] 因此，研究很困难。 你会遇到很多失败，但你不能放弃。 所以，我不会放弃，所以他们不应该放弃基础科学，因为那些冒险的实验将带领我们摆脱困境。

Carlos Pardo 博士： [00:48:13] 所以，艾米告诉我们科学家也有韧性。 谢谢。 Nischay，你的主要信息是什么？

Nischay Mishra 博士： [00:48:22] 我的第一个主要信息是，我很高兴，我认为我们很幸运，过去两年我们没有看到任何 AFM 病例，我希望它继续这样下去。 但即使是那种情况，如果发生任何事情，那么所有的努力，比如所有正在倾听我们的父母和监护人，如果他们觉得，并且他们从社区或任何人那里了解任何类似的情况否则，他们应该传播信息。

[00:48:48] 人们应该以其他方式联系我们或 Pardo 博士，以便我们能够正确地发现问题。 就像艾米说的，是的，当然，基础科学一直是做事和使用这些东西的支柱，比如新的现代方法、高吞吐量数据和机器学习，我们一直在做一些不可能的事情，也许五年，十年前。

[00:49:11] 去年，我们已经看到我们能够以多快的速度实现 COVID-19 的诊断、治疗以及疫苗。 我认为这是我们的模板，对于其他新出现的疾病和传染病，我们可以一起工作，临床医生、家长、科学家、制造商、生物技术和制药集团。 如果我们共同努力并及时审视，我们可以解决任何问题。

Carlos Pardo 博士： [00:49:41] 谢谢你，Nischay。 艾琳，你的主要信息是什么？

余爱玲医生： [00:49:44]当然可以。 就父母和临床医生而言，我会同意认可 AFM。 一旦你做了，请住院并报告。 而且，因为它不常见，这就是为什么这些生物储存库如此宝贵，如果可能的话，我们会鼓励每个人都能够参与。

Carlos Pardo 博士： [00:50:08] 谢谢你，艾琳。 Janell，您要向观众传达的主要信息和最后信息是什么？

Janell Routh 博士： [00:50:14] 谢谢，卡洛斯。 我觉得这与 Nischay 和 Amy 刚才提到的很多内容相呼应。 我今天环顾这个小组，我看到了来自基础科学的代表，来自你作为临床医生的代表，来自 CDC 的 Eileen 和我。 它提醒我，我们所有人都将为这种非常复杂的疾病找到答案，我们每个人都需要发挥自己的作用，才能找到一些仍然存在的令人费解的问题的答案原子力显微镜。

[00:50:50] 这让我意识到自 2018 年以来我们已经走了多远，这是我们 AFM 案例的最后一次大激增。 我觉得我们真的作为一个社区走到了一起，包括 SRNA 和父母，真正形成了一个紧密的社区，在原子力显微镜的各个方面工作，提高认识，正如 Eileen 提到的，当然还有 Amy 提到的基础科学研究Nischay 正在指挥。 我真的很期待在接下来的几年里看到我们能找到什么，因为我们确实已经取得了长足的进步。

Carlos Pardo 博士： [00:51:25] 谢谢你，贾内尔。 我要对大家说的最后一句话是，要深入了解原子力显微镜，唯一的方法就是合作精神。 如果我们不能与家庭、患者、医疗保健提供者、参与研究的科学家、实验室的基础科学研究以及正在寻找的流行病学家建立良好的伙伴关系，我们就无法解决 AFM对于与这些相关的风险因素，负责照顾患者的临床医生、治疗师。 所以，这是一个团队的努力。

[00:52:01] 所以，主要信息是我们需要在 SRNA 的帮助下继续合作，我们有一个很好的团体，急性弛缓性脊髓炎协会，属于急性弛缓性脊髓炎协会的父母，属于急性弛缓性脊髓炎工作组的科学家和许多其他人一起工作，只是为了了解 AFM。

[00:52:25] 因此，主要信息是让我们继续合作并参与这项重要的工作，以帮助我们的患者和家人。 非常感谢你今天早上有空，也感谢 Roberta 让我们讨论这个重要问题。

罗伯塔佩斯： [00:52:40] 嗯，是的。 非常感谢大家。 我们非常感谢您的宝贵时间。 很高兴看到这么多专家聚在一起讨论如此重要的话题。 所以，非常感谢大家。